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[推荐]光学显微镜的相关技术介绍
来源:  作者:本站

(2) 荧光镜检术的注意事项
a. 激发光长时间的照射,会发生荧光的衰减和淬灭现象,因此尽可能缩短观察时间,暂时不观察时,应用挡板遮盖激发光。
b. 作油镜观察时,应用"无荧光油"。
c. 荧光几乎都较弱,应在较暗的室内进行。
d. 电源最好装稳压器,否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命,也会影响镜检的效果。
目前许多新兴生物研究领域应用到荧光显微镜,如基因原位杂交(fish)等等。
5. 相衬显微镜(phase contrast microscope)
在光学显微镜的发展过程中,相衬镜检术的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时很难观察到标本。

相衬显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现象,将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差,即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。这大大便利了活体细胞的观察,因此相衬镜检法广泛应用于倒置显微镜中。
相衬镜检法在装置上与明场不同,有一些特殊要求:
a. 环状光阑(ring slit): 装在聚光镜的下方,而与聚光镜组合为一体---相衬聚光镜。它是由大a. 小不同的环形光阑装在一圆盘内,外面标有10x、20x、40x、100x等字样,与相对应倍数的物镜配合使用。
b. 相板(phase plate): 装在物镜的后焦平面处,它分为两部分,一是通过直射光的部分,为半透明的环状,叫共轭面;另一是通过衍射光的部分,?quot;补偿面"。有相板的物镜称"相衬物镜",外壳上常有"ph"字样。
相衬镜检法是一种比较复杂的镜检方法,想要得到好的观察效果,显微镜的调试非常重要。除此之外还应注意以下几个方面:
a. 光源要强,全部开启孔径光阑;
b. 使用滤色片,使光波近于单色。
6. 微分干涉对比显微镜(differential interference contrast dic)
微分干涉对比镜检术出现于60年代,它不仅能观察无色透明的物体,而且图象呈现出浮雕壮的立体感,并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点,观察效果更为逼真。
(1) 原理
微分干涉对比镜检术是利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束。分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等,光束分别在距离很近的两点上通过被检物体,在相位上略有差别。由于两光束的裂距极小,而不出现重影现象,使图象呈现出立体的三维感觉。
(2) 微分干涉对比镜检术所需的特殊部件:
a. 起偏镜
b. 检偏镜
c. 渥拉斯顿棱镜2 块
(3) 微分干涉对比镜检时的注意事项
a. 因微分干涉灵敏度高,制片表面不能有污物和灰尘。
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